在培養基開發過程中,除去培養基中的支原體是至關重要的,以確保細胞培養的健康和實驗結果的準確性。以下是一些常用的方法來清除培養基中的支原體:
抗生素治療:
使用抗生素是清除支原體的一種有效方法。常用的抗生素包括泰樂菌素、林可霉素、壯觀霉素、喹諾酮和四環素等。
德國MB Zell Shield®細胞支原體祛除試劑是一種即用型的復合抗生素,可用于保護細胞培養體系免受支原體等污染物的干擾。
在使用抗生素時,需要根據支原體類型和藥物敏感性選擇合適的藥物,并按照藥物說明書進行操作。
熱處理:
將細胞培養基加熱至60℃以上可以有效地殺死支原體。然而,這種方法也會殺死細胞,因此只能在實驗結束后或不需要保持細胞活性的情況下使用。
過濾:
使用過濾器可以將細胞培養基中的支原體過濾掉。但這種方法可能無法清除支原體,且對于小分子的支原體可能效果不佳。
更換培養基:
一旦發現支原體污染,應立即更換新的細胞培養基,以避免支原體繁殖并擴散到整個培養體系中。
細胞株更換:
如果細胞株本身存在支原體污染,應立即更換新的、未受污染的細胞株。
純化清洗:
對于珍貴的細胞,可以通過純化清洗的方法去除支原體。這通常涉及使用PBS或培養基洗滌細胞數次,并通過離心力分離細胞和支原體。
預防措施:
在培養基開發和細胞培養過程中,采取預防措施是防止支原體污染的關鍵。這包括定期對實驗室環境進行消毒、對實驗操作人員進行培訓、以及定期對培養箱和其他實驗設備進行維護和檢查。
綜上所述,清除培養基中的支原體需要綜合使用多種方法,并根據具體情況選擇合適的方法。同時,預防措施的采取也是至關重要的,以減少支原體污染的風險。